盐酸水苏碱在中药生产过程中的含量变化及影响因素研究

1、盐酸水苏碱在中药消费过程中的含量变化及影响因素研究【摘要】目的讨论盐酸水苏碱在中药消费过程中的含量变化及影响因素。方法建立盐酸水苏碱HPL含量测定方法，考察提娶浓缩、枯燥工艺中各影响因素对盐酸水苏碱保存率的影响，分析益母草药材储藏过程中的各主要影响因素。结果水提取工艺中提取时间、提取温度、提取次数、水用量对盐酸水苏碱的影响较小；浓缩过程中盐酸水苏碱有一定损失，但浓缩温度、浓缩时间、真空度并非主要影响因素；枯燥过程中的温度、真空度、时间等参数对盐酸水苏碱的影响较校在益母草储藏过程中，见光降解是盐酸水苏碱含量下降的主要原因。结论光对盐酸水苏碱的稳定性有重大影响。【关键词】盐酸水苏碱益母草高效液相色

2、谱见光降解Abstrat：bjetiveTexplrethententhangefstahydrinehydrhlrideinhineseediineprdutinpress.ethdsAnHPLethdasestablishedstahydrinehydrhlridetdeterinethententfretentinratefstahydrinehydrhlrideasappliedastheparaeterstinvestigatethepressesfextratin,nentratinanddryingandtheainfatrsinthestragefherbalenuriasin

3、vestigatedbyfatrialanalysis.ResultsTheinflueneftie,teperature,frequeny,andatervlueinextratinpresststahydrinehydrhlrideaseak.Thereisalittlelssfstahydrinehydrhlrideinnentratinpress;theinfluenefteperature,tie,andvauuvaluetstahydrinehydrhlrideaseak.Depsebylightasthestiprtantfatrtntentdelinefstahydrinehy

4、drhlrideinthestragefherbalenuri.nlusinLightshedaarkedinfluenenthestabilityfstahydrinehydrhlride.Keyrds：Stahydrinehydrhlride；Herbalenuri；HPL；Depsebylight益母草为唇形科植物益母草LenurusjapniusHutt.的新颖或枯燥地上局部，主治月经不调、胎漏难产、行经腹痛及产后瘀阻等症，有“血家圣药“经产良药之称。近年来其逐步被应用于心脑血管疾病的防治，临床效果较好，疗效甚至超过复方丹参注射液1。现代药理研究说明2，益母草中的益母草碱、盐酸水苏碱等

5、多种生物碱具有较强的兴奋子宫、抗血小板聚集、降低血液黏度、抑制血栓形成等作用。据统计，药典及部颁标准中含益母草的多数中成药，其盐酸水苏碱的理论保存率理论保存率成品中待测成分的标示总量/处方中待测成分的药典规定最低总量100%均低于40。在产后逐瘀胶囊及妇血安片的成品检验中同样发现，两者的盐酸水苏碱理论保存率均低于20，局部批次甚至不合格。同时，在对益母草药材进展挑选的过程中发现，各产地的药材盐酸水苏碱含量差异较大，且同一产地新上市药材的含量明显高于去年上市的老药材。为了考察其原因，本研究讨论了中药消费中提娶浓缩、枯燥工艺过程对盐酸水苏碱含量的影响，并对益母草药材的稳定性影响因素进展了初步研究。

6、1仪器与试药HP1100高效液相色谱仪(G1322ADegasser，G1311AQuatPup，G1313AAlS，G1316Al，G1315ADAD)HPheStatin色谱工作站；KQ3200DE型医用数控超声仪昆山市超声仪；GL45型密闭耐压瓶SHTT；N-11型旋转蒸发仪日本EYELA；S101-1E电热鼓风枯燥箱重庆万达仪器；DZF-6050真空枯燥箱上海精宏实验设备；B-290Buhiinispray-dryer瑞士Buhi公司；HZ-B型动态微波真空枯燥机广州兴兴微波能设备。益母草药材购于广州清平药材市场，经广州中医药大学赖小平教授鉴定；盐酸水苏碱对照品供含量测定用，批号：11

7、0712-202207，购自中国药品生物制品检定所；磷酸二氢钾、三乙胺、磷酸是分析纯。2方法与结果2.1盐酸水苏碱含量测定2.1.1色谱条件PhenenexLunasx色谱柱(4.6250，5)；流动相为0.05lL-1磷酸二氢钾含0.03三乙胺和0.1磷酸，pH=3；流速1lin-1，柱温30，进样量10l。盐酸水苏碱在上述色谱条件下与其他成分实现了基线别离。见图12。2.1.2标准曲线的绘制取盐酸水苏碱对照品适量，精细称定，加0.1lL-1盐酸溶制成每毫升含盐酸水苏碱1g的对照品溶液。分别精细汲取对照品溶液2，4，6，8，10，12l进展色谱测定，按上述色谱条件测定峰面积，以进样量Y，g对

8、峰面积X,Ause进展线性回归，回归方程为：Y=290.44X+125，r=0.9998。2.1.3供试品溶液的制备取样品溶液，盐酸调节pH值至12，通过D101大孔树脂内径1.5,柱高10，以0.1lL-1盐酸溶液150l洗脱，合并洗脱液；将上述洗脱液通过0017732强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂内径1.5，柱高15，水洗至流出液呈中性，弃去水洗脱液；再用2lL-1氨溶液150l洗脱，搜集洗脱液，蒸干，残渣用0.1lL-1盐酸溶液溶解并转移至5l容量瓶中，加0.1lL-1盐酸溶液至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。精细汲取10l，进样，按上述色谱条件进展HPL测定，即得。2.2水提

9、取工艺对盐酸水苏碱的影响结合益母草消费中多以水为提取溶媒的实际情况，为考察水提取过程中各工艺参数对盐酸水苏碱含量的影响，本研究选用L934正交表进展实验，设定提取时间、提取温度、提取次数、水用量为考察因素见表1，以盐酸水苏碱总量为考察指标。结果见表2。对表2结果进展统计学处理。结果见表3。表1因素程度，表2正交实验方案及结果，表3方差分析略。极差及方差分析结果说明，各因素对提取效果的影响程度依次为BAD，但各因素均无显著性差异。结果显示，随着各工艺参数强度的增加，其盐酸水苏碱提取率也逐渐升高，最高到达93。提示常规水提取工艺过程对盐酸水苏碱的影响较校转贴于论文联盟.ll.2.3浓缩工艺对盐酸水

10、苏碱的影响模拟消费状态下水提取液在浓缩过程中常采用的工艺参数，以考察浓缩过程对盐酸水苏碱的影响。将益母草切段1左右，称取500g，加20倍量水80温浸2h，滤过，滤液备用。将所得滤液加水补足至6000l，等分成12份，每份500l，置于旋转蒸发仪中，通过控制加热温度70100、真空度-0.07Pa常压，分别使其浓缩至稠膏状态10g左右，记录相应浓缩时间，并按照前面建立的盐酸水苏碱含量测定方法测定含量，并计算盐酸水苏碱总量及实际保存率实际保存率样品中待测成分的实际总量/投料药材中待测成分的实际总量100%。结果见表4。表4不同浓缩状态下盐酸水苏碱的含量测定略结果显示，在常压浓缩及不同温度的减压浓

11、缩状态下，益母草提取液中的盐酸水苏碱总量均有所降低，各状态间相差并不明显。提示浓缩过程对盐酸水苏碱有一定影响，但浓缩温度、真空度、时间等并非主要影响因素。2.4枯燥工艺对盐酸水苏碱的影响结合目前国内中药消费的实际情况，分别考察常压枯燥、减压枯燥、真空微波枯燥、喷雾枯燥等常用枯燥方法对盐酸水苏碱的影响。将益母草切段1左右，称取2000g，加20倍量水80温浸2h，滤过，滤液减压浓缩温度90，真空度-0.07Pa至相对密度为1.1580的清膏，等分成4份，分别采用常压105枯燥，真空枯燥温度80，真空度-0.08Pa，真空微波枯燥温度75，真空度-0.08Pa，喷雾枯燥入口风温度180，出口风温度

12、100。每步均取样测定盐酸水苏碱的含量，并计算盐酸水苏碱总量及实际保存率，结果见表5。表5不同枯燥工艺对盐酸水苏碱含量的影响略结果显示，盐酸水苏碱保存率的上下顺序为真空微波枯燥喷雾枯燥真空枯燥常压枯燥，枯燥时间以喷雾枯燥、真空微波枯燥最少。提示枯燥过程中的温度、真空度、时间等参数对盐酸水苏碱的影响较校2.5益母草药材稳定性研究结合上述提取浓缩枯燥工艺的研究结果，将温度因素排除后，初步分析益母草药材在储存过程中出现含量下降的因素可能包括酶解、见光降解等，并按照析因设计法进展以下实验：普通处理：取益母草药材1000g，分装于透明塑料封口袋中，封口，室温保存；灭酶处理：取益母草药材1000g，置于高

13、压灭菌锅中，121高压灭菌20in，取出，晒干，分装于透明塑料封口袋中，封口，室温保存；避光处理：取益母草药材1000g，分装于铝箔袋中，封口，室温保存；灭酶、避光处理：取益母草药材1000g，置于高压灭菌锅中，121高压灭菌20in，取出，晒干，分装于铝箔袋中，封口，室温保存。以上各批试验分别于0，1，2，3，5，8，12月进展取样，测定盐酸水苏碱的含量，并采用SPSS统计软件对各组保存率进展析因分析，结果见表6。表6益母草药材稳定性研究略表6及析因分析结果说明，见光降解为盐酸水苏碱含量下降的主要原因P0.01，酶解并非其主要原因P0.05，且不存在交互作用P0.05。在缺乏避光处理的情况下

14、，益母草药材中的盐酸水苏碱保存率急剧下降，储存1年后仅保存40左右。3讨论在HPL样品制备过程中，通过结合使用大孔树脂和离子树脂，减少了杂质成分对盐酸水苏碱在紫外末端吸收的干扰影响，使本方法的简便性、重复性较?中国药典?2022版所采用的TLS显著进步。产后逐瘀胶囊及妇血安片的HPL含量测定结果说明，本方法同样适用于含益母草中成药的含量测定。中药消费包含炮制加工、储藏、煎煮、浓缩、枯燥等过程，各过程中有效成分所受到的影响因素及作用大小又不尽一样。在本研究中，针对含益母草成药中盐酸水苏碱含量低下的问题，我们对益母草的常规水提娶浓缩、枯燥工艺进展细致研究。结果说明，盐酸水苏碱在提娶浓缩、枯燥过程中

15、没有明显损失，即高温、高压、湿热等并非其主要影响因素。排除消费中可能存在的原因后，本研究对益母草药材的自身稳定性按照析因设计进展研究。结果说明，盐酸水苏碱易见光降解，储存一年后的益母草药材中盐酸水苏碱保存率仅为40左右。盐酸水苏碱见光降解的详细机制及益母草提取物是否同样会发生降解反响等尚未明确，仍有待进一步研究。本研究提示，在进展益母草相关品种研究时，应足够重视药材或成品的避光保存。【参考文献】1陶丽华，顶峰，李虎将益母草用于治疗缺血性疾病的临床应用J通化师范学院学报，2022，24(6)：292阮金兰，杜俊蓉，曾庆忠，等益母草的化学、药理和临床研究进展J中草药，2022，3411：15.转贴于论文联盟.ll.